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線粒體染色試劑盒可做的事情還蠻多的

更新時間:2018-07-10      點擊次數(shù):1372
  線粒體染色試劑盒可以標記活細胞中的線粒體,使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 本試劑盒使用染料為一種疏水性復合物,屬線粒體選擇性染料,該染料能輕易進入活細胞內,通過線粒體膜電位變化滲透進入線粒體,并在線粒體中富集。Smart Cell線粒體染色試劑盒提供了標記線粒體的全套試劑,能提供藍色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇,既可單獨使用,也支持對細胞的多重熒光分析。這種的細胞標簽為從空間上和時間上研究發(fā)生的細胞活動提供了一種十分有效的方法。
 
  線粒體染色試劑盒檢測原理,L-谷氨酰胺是人體蛋白質所必需的20種氨基酸之一。是人體內zui普遍的、不可缺乏的條件性必需氨基酸,是構成蛋白質*的氨基酸之一,更是某些細胞培養(yǎng)中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不穩(wěn)定的特性,在細胞培養(yǎng)基的整合中,易自發(fā)性分解為谷氨酸和氨離子,而氨離子對細胞的毒性很強,因此,在細胞培養(yǎng)體系中,須密切關注谷氨酰胺的儲存壽命(SHELF LIFE)和實時監(jiān)測。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的雙酶循環(huán)反應系統(tǒng)中,L-谷氨酰胺首先發(fā)生脫氨基反應,產(chǎn)生谷氨酸和氨離子。
 
  線粒體染色試劑盒細胞染色,貼壁細胞,在96孔板(100μL)或培養(yǎng)皿內培養(yǎng)細胞,當細胞達到70-80%融合度,在96孔板或培養(yǎng)皿內添加等體積的染色工作液(步驟1.2),在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TRITC設置在顯微鏡下進行熒光觀察。注意:如果細胞沒有充分染色,可以適當增加染料濃度或增加染色時間進行改善。懸浮細胞: 在1000 rpm 條件下離心細胞培養(yǎng)液5分鐘,棄去上清,用預熱好的細胞培養(yǎng)液溫和的重懸細胞,然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細胞30分鐘-2小時。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TexasRed設置在顯微鏡下進行熒光觀察。
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